內容簡介:《免疫學技術及應用》首先介紹了天然免疫和獲得性免疫中免疫細胞（包括單核巨噬細胞、DC、NK、T細胞、B細胞等）、免疫分子（包括抗體、補體、細胞因子、HLA、TLR等）的理論背景和研究方法。然后介紹了免疫學相關實驗技術，如免疫標記技術、流式細胞檢測和分選技術、免疫相關分子生物學技術、蛋白質電泳技術、凋亡檢測技術等的原理和應用，并融合了免疫學新前沿技術，如RNA干擾技術、miRNA技術、蛋白質相互作用、BIAcore技術、激光掃描共聚焦顯微鏡技術、動物疾病模型、轉基因動物等?！睹庖邔W技術及應用》理論性、實用性和前沿性緊密結合，在闡述免疫學基本技術、經典實驗的同時，史注重免疫學技術的新發(fā)展與在實際科研工作中的合理應用?！睹庖邔W技術及應用》貫穿理論聯(lián)系實際的原則，力求原理清晰、簡明規(guī)范、通俗易懂、要點突出、指導性強，強調實驗的影響因素和關鍵的注意事項，以減少讀者存實驗方法選擇上的失誤和操作上的差錯?！睹庖邔W技術及應用》編者大多是有著豐富的免疫學教學經驗，且在一線從事免疫學科研工作的中青年教師。

目錄:目錄
前言
第一章 單核吞噬細胞 1
第一節(jié) 單核吞噬細胞簡介 1
第二節(jié) 單核巨噬細胞的分離 2
一、人外周血單個核細胞的分離 3
二、小鼠腹腔巨噬細胞的分離和純化 4
三、小鼠肺內巨噬細胞的分離 6
四、骨髓巨噬細胞的分離和誘導培養(yǎng) 7
第三節(jié) 單核巨噬細胞表型檢測 8
一、直接法流式檢測巨噬細胞的表型 9
二、間接法流式檢測巨噬細胞的表型 10
第四節(jié) 巨噬細胞的活化及相關檢測 11
一、巨噬細胞的活化 11
二、超氧陰離子的檢測 12
三、一氧化氮的檢測 13
第五節(jié) 巨噬細胞吞噬和殺傷功能的檢測 15
一、巨噬細胞吞噬雞紅細胞 15
二、巨噬細胞吞噬FITC標記的細菌 16
三、巨噬細胞殺傷功能的檢測 17
四、Fc受體介導的吞噬作用 19
五、FcR介導的黏附作用 20
第六節(jié) 巨噬細胞抗腫瘤活性的檢測 21
一、H33342釋放法檢測巨噬細胞對靶細胞的殺傷 22
二、51Cr釋放法檢測巨噬細胞對靶細胞的殺傷 23
第七節(jié) 單核巨噬細胞趨化功能的檢測 24
第八節(jié) 結語 26
參考文獻 28
第二章 樹突狀細胞 29
第一節(jié) 樹突狀細胞的分離 29
一、小鼠脾臟樹突狀細胞的分離 29
二、人外周血樹突狀細胞的分離 31
第二節(jié) 樹突狀細胞的培養(yǎng) 34
一、小鼠骨髓前體細胞培養(yǎng)樹突狀細胞 34
二、人樹突狀細胞的培養(yǎng) 35
第三節(jié) 樹突狀細胞表型和功能檢測 38
一、表型檢測 38
二、吞噬功能檢測 39
三、NO檢測 40
四、細胞因子的檢測 41
五、抗原提呈功能檢測 41
六、混合淋巴細胞反應 42
第四節(jié) 漿細胞樣樹突狀細胞 43
一、漿細胞樣樹突狀細胞的分離 44
二、漿細胞樣樹突狀細胞的培養(yǎng) 45
三、漿細胞樣樹突狀細胞表型及功能檢測 47
第五節(jié) 其他樹突狀細胞亞群 47
參考文獻 49
第三章 NK與NKT細胞 50
第一節(jié) 概述 50
第二節(jié) NK細胞的分離 51
一、各種NK細胞分離方法的比較 51
二、人的NK細胞的分離 52
三、小鼠的NK細胞的分離 56
第三節(jié) NK細胞的功能檢測 60
一、靶細胞的選擇 62
二、形態(tài)學檢測法 62
三、同位素釋放實驗:51Cr釋放檢測法 63
四、LDH釋放檢測法 64
五、AnnexinV/7GAAD標記流式檢測法 66
第四節(jié) 小鼠體內刪除NK細胞 67
第五節(jié) NKT細胞 69
一、人NKT細胞的分離與培養(yǎng) 69
二、小鼠NKT細胞的分離與培養(yǎng) 75
參考文獻 77
第四章 T淋巴細胞 78
第一節(jié) 引言 78
第二節(jié) T細胞分離 79
一、尼龍棉柱分離法 79
二、E花環(huán)分離法 80
三、微量細胞毒法 82
四、磁珠分選法 83
五、流式分選法 84
第三節(jié) T細胞亞群的分離與培養(yǎng) 85
一、CD4＋T細胞及其亞群的分離培養(yǎng) 85
二、CD8＋T細胞分離培養(yǎng)以及CTL的體外誘導 88
第四節(jié) T細胞克隆及T細胞雜交瘤的建立 89
一、人T細胞克隆的建立 89
二、T細胞雜交瘤技術 92
第五節(jié) T細胞增殖實驗 95
一、體外增殖檢測 95
二、體內增殖檢測 99
第六節(jié) 抗原特異性T淋巴細胞反應 102
一、CD4＋T淋巴細胞反應 102
二、CD8＋T淋巴細胞反應 103
第七節(jié) 混合淋巴細胞反應 105
一、單向混合淋巴細胞反應 105
二、雙向混合淋巴細胞反應 106
第八節(jié) CTL殺傷實驗 107
一、51Cr釋放法 107
二、LDH釋放法 109
三、流式細胞標記法 110
四、體內殺傷實驗 111
第九節(jié) 調節(jié)性T細胞的分離、誘導分化與功能檢測 112
一、Treg的分離純化 113
二、Treg的體外誘導分化 114
三、Treg的功能檢測 115
第十節(jié) 記憶性T細胞的研究方法 117
一、流式胞內染色技術 118
二、Tetramer技術的原理與應用 120
三、TCR轉基因小鼠 122
參考文獻 124
第五章 B淋巴細胞 126
第一節(jié) 概述 126
第二節(jié) B淋巴細胞的分離和亞群鑒定 126
一、B淋巴細胞的分離 126
二、各類B細胞亞群的鑒定和分離 131
三、抗原特異性記憶性B細胞的鑒定 133
第三節(jié) B淋巴細胞的分化發(fā)育鑒定 136
一、從造血干細胞到B淋巴細胞的分化鑒定 137
二、B淋巴細胞在骨髓和脾臟中分化發(fā)育的檢測 139
三、B淋巴細胞在外周免疫系統(tǒng)中的成熟過程檢測 144
四、B淋巴細胞的遷移檢測 145
第四節(jié) B細胞的功能分析 146
一、B淋巴細胞的活化方法 146
二、B淋巴細胞的增殖檢測 147
三、免疫球蛋白的類別轉換的誘導和鑒定 150
四、生發(fā)中心反應和漿細胞的檢測 152
五、B淋巴細胞的信號轉導 158
六、從B淋巴細胞中分離脂筏 164
參考文獻 168
第六章 抗原制備的原理及應用 169
第一節(jié) 天然抗原的制備原理及應用 169
一、抗原的粗提 170
二、抗原的分離純化 171
三、抗原的濃縮 180
四、抗原的保存 181
五、抗原的鑒定 182
第二節(jié) 人工抗原的制備原理 182
一、人工結合抗原 182
二、人工合成多肽抗原的制備原理和應用 184
參考文獻 187
第七章 抗體 188
第一節(jié) 概述 188
第二節(jié) 多克隆抗體的制備及鑒定 189
一、抗血清的制備 189
二、抗血清質量的檢測 191
第三節(jié) 單克隆抗體的制備及鑒定 191
第四節(jié) 基因工程抗體的人源化策略和方法 197
一、基因工程抗體的人源化及其高效表達 198
二、小分子抗體 209
第五節(jié) 抗體的純化 211
一、樣品的預處理 211
二、蛋白A或蛋白G交聯(lián)瓊脂糖凝膠親和層析法純化抗體 212
參考文獻 214
第八章 補體 216
第一節(jié) 概述 216
第二節(jié) 補體活性的測定 217
一、血清補體總活性的測定 217
二、補體旁路途徑的總補體活性的測定 220
第三節(jié) 補體介導的細胞毒實驗 221
一、形態(tài)學方法檢測補體介導的細胞毒活性 221
二、其他方法 222
第四節(jié) 補體結合的相關實驗 223
一、補體結合實驗 223
二、免疫黏附血凝實驗 223
第五節(jié) 補體成分的測定 225
一、C4的測定 225
二、B因子的測定 227
三、C3的測定 229
四、C1q的測定 230
五、C1INH的測定 230
第六節(jié) 補體遺傳多態(tài)性的檢測 231
一、C4遺傳多態(tài)性的檢測 231
二、C2遺傳多態(tài)性的檢測 233
三、B因子遺傳多態(tài)性的檢測 234
參考文獻 234
第九章 細胞因子及細胞因子受體 235
第一節(jié) 概述 236
第二節(jié) 白細胞介素 239
一、白細胞介素及其他細胞因子調節(jié)細胞生長的檢測 239
二、一些IL的特殊生物學活性的檢測 248
三、IL蛋白質的檢測 250
四、ILmRNA的檢測 250
第三節(jié) 腫瘤壞死因子 250
一、檢測TNF及細胞因子細胞毒活性的方法 251
二、TNF及其受體家族成員蛋白質的檢測 254
三、TNF及其受體家族成員 mRNA的檢測 255
第四節(jié) 干擾素 255
一、檢測IFN和其他細胞因子抗病毒活性的方法 255
二、檢測IFN生物學活性的其他方法 260
三、IFN蛋白質的檢測 262
四、IFNmRNA的檢測 262
第五節(jié) 趨化因子 263
一、趨化因子趨化活性的檢測 263
二、趨化因子蛋白質的檢測 273
三、趨化因子mRNA的檢測 273
第六節(jié) 集落刺激因子 273
一、SCF誘導MC/9細胞增殖試驗 274
二、集落形成試驗 275
三、CSF蛋白質的檢測 280
四、CSFmRNA的檢測 281
第七節(jié) 細胞表面和細胞內細胞因子檢測技術 281
一、細胞表面細胞因子的分析 282
二、細胞內細胞因子的分析 286
第八節(jié) 細胞因子受體研究技術 290
一、膜型細胞因子受體檢測方法 291
二、可溶性細胞因子受體檢測方法 294
參考文獻 294
第十章 人白細胞抗原分型技術 295
第一節(jié) HLA和HLA分型概述 295
一、HLA概念 295
二、HLA抗原分類 295
三、HLA遺傳特點 296
四、HLA分型及醫(yī)學應用 297
第二節(jié) 血清學分型技術 297
一、HLAGA、HLAGB、HLAGC抗原的血清學分型方法 298
二、HLAGDR、HLAGDQ抗原的血清學分型方法 299
第三節(jié) 細胞學分型技術 300
一、純合子細胞分型法 301
二、預致敏淋巴細胞定型法 301
第四節(jié) DNA分型技術 302
一、限制性片段長度多態(tài)性-聚合酶鏈反應 302
二、序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈反應 302
三、序列特異性引物-聚合酶鏈反應 303
四、單鏈構象多態(tài)性-聚合酶鏈反應 303
五、PCR指紋圖譜 304
六、基因芯片 304
七、展望 305
參考文獻 305
第十一章 模式識別受體 307
第一節(jié) 模式識別受體的種類 307
第二節(jié) Toll樣受體的信號轉導 309
一、Toll樣受體信號轉導的主要途徑及常用研究方法 309
二、Toll樣受體信號分子功能研究的主要方法 311
參考文獻 313
第十二章 免疫熒光技術 314
第一節(jié) 概述 314
第二節(jié) 免疫熒光技術的基本原理 315
一、抗原 抗體反應 315
二、熒光的產生原理 315
三、熒光效率和影響熒光效率的因素 315
第三節(jié) 免疫熒光的基本技術 316
一、抗體的選擇 316
二、熒光素的選擇 316
三、熒光素的種類 316
四、熒光素標記抗體的方法 319
五、熒光抗體的保存 321
六、免疫熒光技術的染色方法 321
第四節(jié) 免疫熒光的分析和檢測技術 323
一、熒光偏振免疫分析 324
二、時間分辨熒光免疫分析 324
參考文獻 327
第十三章 放射免疫技術 328
第一節(jié) 標記抗原的放射免疫技術 328
一、放射免疫技術原理及應用 328
二、實驗方法 332
三、放射免疫分析的應用舉例 337
第二節(jié) 標記抗體的免疫放射技術 338
一、免疫放射技術原理 338
二、免疫放射分析的應用舉例 340
第三節(jié) 放射受體分析技術 341
一、放射受體分析技術原理 341
二、放射受體分析應用舉例 343
第四